Products

Fanandramana chromatography ranon-javatra vaovao avo lenta ho an'ny glycosyltransferases mifototra amin'ny derivatization miaraka amin'ny asidra anthranilic sy ny fitiliana fluorescence.

Ny assays dia novolavolaina tamin'ny fampiasana ny simika fametahana tsy manam-paharoa amin'ny asidra 2-aminobenzoic (2AA; asidra anthranilic, AA) ho fandrefesana ny asan'ny β1-4 galactosyltransferase (GalT-1) sy α2-6 sialyltransferase (ST-6) amin'ny alàlan'ny ranon-javatra avo lenta. chromatography (HPLC) miaraka amin'ny fluorescence detection (Anumula KR. 2006. Fandrosoana amin'ny fluorescence derivatization fomba ho an'ny avo-performance ranon-javatra chromatographic fanadihadiana ny glycoprotein carbohydrates. Anal Biochem. 350:1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) sy N-acetyllactosamine dia nampiasaina ho mpandray ary uridine diphosphate (UDP) -galactose sy cytidine monophosphate (CMP) -N-acetylneuraminic acid (NANA) ho mpamatsy vola ho an'ny GalT-1 sy ST-6.Ny vokatra enzymatic dia voamarika amin'ny toerana miaraka amin'ny AA ary nosarahina tamin'ny substrate tamin'ny tsanganana TSKgel Amide 80 tamin'ny fampiasana fepetra ara-dalàna.Ny singan'ny enzyme dia nofaritana avy amin'ny faritra ambony indrindra amin'ny fampitahana amin'ny fenitra mifanaraka amin'ny Gal-β1-4GlcNAc sy NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc.Ny linearity (fotoana sy ny fifantohana amin'ny enzyme), ny fahitsiana (intra- sy ny interassay) ary ny reproducibility ho an'ny fitiliana dia napetraka.Ny fitiliana dia hita fa ilaina amin'ny fanaraha-maso ny asan'ny enzyme mandritra ny fitokanana sy ny fanadiovana.Ny fitiliana dia tena saro-pady ary natao mitovy na tsara kokoa noho ny fandrefesana mifototra amin'ny siramamy radioaktifa mahazatra.Ny endrika assay dia azo ampiasaina koa amin'ny fandrefesana ny asan'ny transferase hafa, raha toa ka misy fiafaran'ny fametahana marika ny mpandray karbôgria.Ny fitsapana ho an'ny mpandray glycoprotein dia novolavolaina tamin'ny fampiasana IgG.Ny fomba fohy HPLC profiling dia novolavolaina ho an'ny fisarahana ny glycans IgG (bintennary G0, G1, G2, mono- ary disialylate), izay nanamora ny famaritana ny hetsika GalT-1 sy ST-6 amin'ny fomba haingana.Ankoatr'izay, ity fomba fanaovana profiling ity dia tokony hanaporofo fa ilaina amin'ny fanaraha-maso ny fiovan'ny glycans IgG amin'ny toeram-pitsaboana.